2月中下旬以來，新型冠狀病毒肺炎戰疫已進入攻堅階段，湖北以外30個省區市和新疆生產建設兵團新增確診病例人數14連降，2月17日，湖北以外，新增確診病例79例。但是，疫情發展至今，隱匿性感染病例開始逐漸浮出水面，前線核酸檢測試劑盒漏檢的問題也一再暴露，陽性檢出率只有30%-50%，并且樣本采集風險大，對醫護人員存在潛在感染風險，檢測耗時也長。如果不能及時對隱匿性、或者有疑似癥狀而核酸檢測呈陰性的病人做出診斷，將給疫情防控增加挑戰。

我局在密切關注試劑盒漏檢問題的同時，也關注到了由鐘南山院士指導開發的新型冠狀病毒的IgM快速檢測試紙目前已經發往湖北，進行應用試驗。因此，免疫檢測有可能成為新冠狀病毒的輔助檢測手段。

免疫檢測為什么可以派上用場

核酸檢測，也稱為分子檢測，是通過檢測病毒的遺傳物質核酸而做出診斷，是傳染病診斷的金標準。但是由于核酸檢測靈敏度高，對樣本采集，實驗室要求，實驗人員的技術水平要求極高，而且檢測時間長。從前方反饋來看，現在針對COVID-19病毒核酸檢測試劑盒漏檢率極高，通常需要采集三到四次樣才能確診。

免疫檢測是通過抗體抗原之間的特異性反應原理，通過檢測體內病毒蛋白（抗原）、或者體內特異性針對病毒蛋白的抗體，對感染做出檢測，廣泛應用于艾滋病病毒、乙型肝炎、丙型肝炎等重大傳染病的檢測。

-1-抗原檢測

典型的傳染病免疫檢測試劑盒-HIV4代

最為典型的傳染病免疫檢測試劑盒是艾滋病HIV檢測試劑盒。通常HIV感染后，人體血清中的標志物出現時間順序為：病毒RNA，p24抗原，抗-HIV抗體。

△HIV感染后體內標志物出現的時間順序

通過上圖可以看到，血清中RNA在感染后10天即可檢測到，15天之后可以檢測到HIV p24抗原，而血清抗體則需要在20天以后才出現。因此通過檢測血清中的p24抗原，可以縮短HIV檢測窗口，對HIV感染做出早期診斷。p24抗原檢測也存在缺陷。在HIV感染爆發早期，p24濃度較高。其后隨著體內抗-HIV抗體的出現，大部分p24抗原與體內抗體結合而無法檢測到。實際上有文獻指出，單檢HIVp24抗原，對于處于感染早期，血清陰性的樣本漏檢率高達75%。

如何能夠通過檢測抗原實現早期檢測，而且同時能夠避免抗原陰性，抗體陽性的漏檢呢？通過近20年的發展，HIV-4代免疫檢測試劑盒能夠同時檢測HIV p24抗原，能夠縮短檢測窗口，同時檢測抗HIV抗體，避免漏檢。

盡管HIV病毒與COVID-19病毒相去甚遠，但是對我們理解傳染病的檢測的原理是相通的。檢測抗原可以縮短檢測窗口，但是與核酸檢測類似，會存在漏檢問題。因此，如果單檢測COVID-19病毒抗原，可以一定程度上提早檢測，但是依然會存在漏檢問題，因此，血清中抗COVID-19抗體的檢測也尤為重要。

-2-抗體檢測

傳染病檢測的另外一個重要方法就是檢測抗體。抗體是免疫球蛋白，由漿細胞產生，廣泛存在于血液，組織液，外分泌液等體液中。免疫球蛋白約占血漿蛋白總量的20%。血清中發現的免疫球蛋白一共有五種，按照重鏈的不同，分為IgG，IgM，IgA，IgE，IgD。

△五種免疫球蛋白

其中IgG是最豐富的免疫球蛋白，大約占總免疫球蛋白的75%，是體液中最重要的抗病原微生物的抗體。

IgM是一個五聚體蛋白，是人體發生感染后第一個產生的抗體，約占免疫球蛋白總量的1/10。感染后首先產生，體內濃度隨后隨著IgG的濃度上升而下降。

IgA主要存在于粘膜表面，唾液，初乳，淚液，汗液等體液當中，參與局部粘膜感染的免疫反應。IgA無法通過胎盤屏障，因此初生6-8個月的嬰兒需要從母乳中獲得IgA。

IgE存在于血液中，是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，可以引起I型超敏反應。

IgD體內含量也很低，可作為膜受體存在于B細胞表面，其作用可能是參與啟動B細胞產生抗體。

IgG和IgM是最常用的傳染病抗體標志物。其中IgM作為感染過程中首先出現的抗體，通常用作急性感染的標志物。隨著感染發展，IgG出現后，IgM濃度逐漸降低消失。而IgG通常會長時間在體內存在，即使體內病毒已經完全清除。因此IgG陽性無法判斷病人處于既往感染或者是感染期。如現在治愈的新型冠狀病毒肺炎患者體內依然存在IgG，但是體內病毒已經被清除。

一篇2003年發表在NJEM的文獻中報道，研究人員從針對20例SARS病人的研究中發現，SARS癥狀出現后的第一周內，20例病人血清中IgM，IgG均呈陰性；癥狀出現后第二周，16例病人IgM陽性，17例病人IgG陽性；第三周后，所有病人的IgM，IgG呈陽性。此后，血清中IgM達到峰值，隨后開始下降；而IgG則持續存在，且濃度緩慢升高。

△SARS病人血清中IgG，IgM變化情況

另一篇2003年發表在Journal of Clinical Microbiology的文章中也指出，SARS感染癥狀出現后的6-10天，68.4%的SARS病人血清抗體呈陽性，10-61天內，90%的病人血清抗體呈陽性。結合兩篇文獻上看，在SARS感染過程中，病人在出現癥狀之后的第一周之后，血清抗體開始呈陽性，且陽性率接近70%。如果按照現在核酸30%-50%的陽性檢出率，抗體檢測試劑盒將是一個很好的補充。

如何看待免疫檢測對確診發揮的作用

尚未找到現階段新型冠狀病毒感染后病人體內免疫標志物的變化情況，因此沒有相關數據展示。通過對SARS病毒的免疫檢測上看，免疫檢測是可以作為新型冠狀病毒檢測的補充，尤其對于出現類似臨床癥狀，而核酸檢測陰性的疑似病例，有極大的補充診斷作用。

但是結合SARS和HIV抗體的檢測經驗，抗體檢測可能無法作為早期無癥狀接觸者的篩查手段。免疫檢測通常采用外周血或指尖血作為檢測樣本，與核酸的咽拭子樣本相比，樣本更穩定，同時還能夠極大的降低醫護人員的采樣風險。另外，免疫檢測流程較為簡單，檢測速度更快，也能夠緩解待測樣本堆積問題。

不過依然需要注意的是，IgG和IgM可能都不適合作為新型冠狀病毒獨立的篩查指標，而是需要結合臨床癥狀，流行病學史進行綜合判斷。并且按照鐘南山院士的意見和建議，武漢至今仍然存在人傳人的現象，無法將新型冠狀病毒感染者、流感病毒感染者以及正常人分開。因此，如果試劑盒能夠同時檢測新型冠狀病毒以及流感病毒，將能夠區分新型冠狀病毒感染和流感病毒感染，最大限度的阻斷人傳人感染。

新型冠狀病毒的戰役還沒有結束，期盼國內IVD企業能夠盡早研發出更好的產品，讓一線醫護人員有更好更強的“武器”可用。

【參考文獻】

1/Li G, Chen X, XuA. Profile of specific antibodies to the SARS-associated coronavirus[J]. NewEngland Journal of Medicine, 2003, 349(5): 508-509.

2/Diagnosis of Severe Acute Respiratory Syndrome(SARS) by Detection of SARS Coronavirus Nucleocapsid Antibodies in anAntigen-Capturing Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

3///hivinsite.ucsf.edu/InSite?page=kb-02-02-02-02#S1X

部分新型冠狀病毒廠家列表